实验简介
Northern杂交(Northern blot)是通过一系列步骤来检测RNA的表达水平来检测基因表达的方法,通过northern杂交方法可以检测到细胞在生长发育特定阶段或者胁迫或病理环境下特定基因表达情况。它主要用于检测不同组织、器官和检测目的基因是否具有可变剪切产物或者重复序列。
Southern杂交(Southern blot)是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量。
实验流程
温馨提示
1.样本收集
①新鲜组织:切成50-100mg碎块放入冻存管或离心管中,液氮速冻,-80℃保存,干冰运输(每泳道约需150-300mg样品);
②细胞样本:贴壁细胞需胰酶消化后离心去上清,悬浮细胞直接离心取上清,PBS洗涤,离心去上清,液氮速冻,-80℃保存,干冰运输。(每泳道约需1*10^7-1.5*10^7细胞量);
③DNA样品:-20℃保存,冰袋运输或干冰运输;
④RNA样品:RNA溶液(DEPC-treated water溶解)需-80℃保存,干冰运输;RNA沉淀(75%无RNA酶乙醇)需-20℃保存,冰袋运输;
2.润鼎生物提供完整实验报告及相关实验数据。